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PBS磷酸鹽緩沖液的配置方法及作用

2023-07-24 瀏覽次數(shù):732

PBS緩沖液,是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaC和KCI,一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。
由于Na2HPO和KH2PO4有二級(jí)解離,緩沖的PH值范圍很廣,而NaCI和KCI主要作用為增加鹽離子濃度。
如有需要PBS還可以補(bǔ)加1mmoI/L CaCI2和0.5mmoI/L MgCI2,以提供二價(jià)陽離子。

配置方法:
稱取8.0g NaCI、0.2g KCI、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800ml蒸餾水中,用HCI調(diào)節(jié)溶液至7.4,最后加蒸餾水定容至1L即可得0.01M PBS緩沖液。

作用:
PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡(jiǎn)稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。
原因是它具有鹽平衡、可調(diào)性的適宜PH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整PH值的作用,對(duì)完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在適合條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是shou選。
PBS也不是萬能的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持最佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其最完整的特性。

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